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渐渐习惯了现代生活的美国队长史蒂夫·罗杰斯（克里斯·埃文斯 Chris Evans 饰），在一次行动后隐隐嗅到神盾局内部所弥漫出来的凶险气味。而当得知神盾局正秘密进行的“洞察计划”后，他更为此感到愤怒。某天，神盾局指挥官尼克-法瑞（塞缪尔·杰克逊 Samuel L. Jackson 饰）遭到一群武装分子袭击，他拼尽全力将一支U盘交到美国队长手中，这里面藏着该局二战以来最重要且最可怕的秘密。在此之后，美国队长因涉嫌杀害尼克而遭到前局长亚历山大·皮尔斯（罗伯特·雷德福/Robert Redford 饰）的通缉和追杀，逃亡中他得到黑寡妇（斯嘉丽·约翰逊 Scarlett Johansson 饰）和退伍老兵“猎鹰”（安东尼·麦凯 Anthony Mackie 饰）的帮助。他们必须争分夺秒解开神盾局的秘密，阻止“洞察计划”的施行……
罗伯特·雷德福 饰 亚历山大·皮尔斯
曾经担任神盾局局长,如今虽已卸下局长职位但仍然担任神盾局高级职位,为弗瑞出谋划策。他备受尊重,并在政界很有人脉,经常和世界各国高官打交道,形象光辉且名声在外,是神盾局在世界上的形象代表。
艾米丽·万凯普 饰 队长新女友
也称作13号探员,是一名年轻,有魅力的神盾局特工,精通武术和武器使用。她的任务是保护美国队长,并且还不能让他知道。她有一套严格的道德准则,并且在自己的原则遇到挑战时勇于直言不讳。莎朗·卡特也是美国队长初恋佩吉·卡特的侄女。
寇碧·史莫德斯 饰 玛丽亚·希尔MariaHill
她是尼克·弗瑞的左右手,没有任何超能力,却精通各种枪械和格斗技巧。她在纽约和复仇者们的并肩作战中证明了自己的价值,以及对神盾局和尼克·弗瑞的忠诚。当她收到尼克·弗瑞的求助后,希尔也被卷入了这场在华盛顿的巨大阴谋,弗瑞和美国队长都已深陷其中。
